[发明专利]一种小球藻抗氧化肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种小球藻抗氧化肽的制备方法，以小球藻为原料，利用稀碱溶胀结合超声波工艺，对小球藻进行破壁处理获得可溶性蛋白质，小球藻蛋白用生物酶法进行水解，获得了抗氧化效果明显的小球藻抗氧化肽。本发明还公开了超低温处理、高压处理结合稀碱溶胀与超声波的处理工艺能提高水溶性蛋白质的得率，并且能进一步提高水解产物的抗氧化能力。本发明所得产品纯度高，抗氧化活性强。

主权项

一种小球藻抗氧化肽的制备方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)小球藻干粉加入蒸馏水混匀，所述蒸馏水的体积用量以小球藻干粉质量计为20mL/g，4℃下搅拌1～3h，得到小球藻混合液，小球藻混合液在‑70℃下冷冻12h，再于30℃下解冻至4℃，在不断搅拌下向解冻后的小球藻混合液中加入NaOH，使NaOH的质量终浓度为1～4％，得到碱性混合液，然后将碱性混合液在4℃下超声破壁处理1～2h，调pH值为7.0，离心分离，取上清液，加入体积为上清液体积4倍的体积分数95％的乙醇，搅拌1～10分钟后，静置5～6小时，再次离心，弃去上清液，取沉淀用蒸馏水清洗，然后用少量蒸馏水溶解，浓缩、冷冻干燥制得小球藻蛋白；(2)小球藻蛋白加0.5mol/L的PBS缓冲液配成6mg/mL浓度的底物水溶液，按酶与底物的质量比1:25加入复合蛋白酶、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶或碱性蛋白酶，在各种酶的最佳反应温度和反应pH条件下，进行酶解反应，反应0.5～5h，然后将酶解液升温至90～95℃反应15～30min，结束酶解反应，所得反应液浓缩至原体积的1/4，冷冻干燥，制得小球藻抗氧化肽。