[发明专利]一种中链烷烃的生产方法

摘要

本发明属于生物化工领域，特别涉及一种中碳链烷烃的生产方法。烷烃主要来源于石油和天然气，也可以通过自然界中一些物种的新陈代谢产生，但是这些微生物生产烷烃的量很低。随着现代分子生物学尤其是合成生物学的飞速发展，调控烷烃合成过程中相关酶的表达，使微生物细胞只需通过简单的代谢就可以产生烷烃，是生产可再生能源的前沿技术。该方法为传统石化燃料供给不足、新型生物燃料不能完全替代石化燃料等问题提供了一个绝佳的解决方案。与其他菌株相比，大肠杆菌具有遗传背景清楚、易于改造、生长速度快、适合高密度发酵等优点，是微生物法合成化学品和燃料的理想菌株。利用大肠杆菌生产生物烷烃是一种不争地、不靠天、可持续生产的新途径。

主权项

一种中链烷烃的生产方法，其特征在于，包括：步骤1、首先将来自大肠杆菌K12菌株中的酰基辅酶A合成酶基因fadD克隆至原核表达载体，得到重组质粒1，经IPTG诱导，可以通过外源性流加C14:0/C16:0等中链脂肪酸的方式，催化脂肪酸生成代谢产物酯酰辅酶A。步骤2、再将不动杆菌中的酰基辅酶A还原酶基因acr克隆至原核表达载体，得到重组质粒2，经IPTG诱导，可以催化细胞中积累的酯酰辅酶A还原为C14/C16的脂肪醛。步骤3、最后将念珠藻中的醛脱羰基酶基因dc克隆至原核表达载体，得到重组质粒3，经IPTG诱导，可以催化脂肪醛脱去羰基，生成烷烃。步骤4、将得到的重组质粒1/3共同转至BL21(DE3)中，经外源性流加C14:0/C16:0等中链脂肪酸与IPTG诱导表达后，可以生产中链烷烃。