[发明专利]一种农杆菌介导的麻疯树遗传转化方法有效
| 申请号： | 201410275476.6 | 申请日： | 2014-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN104087611A | 公开（公告）日： | 2014-10-08 |
| 发明（设计）人： | 刘振兰;刘颖;杨跃生;郑少燕;庄楚雄;李静;陈晓阳 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于植物遗传工程技术领域。具体公开了一种应用于麻疯树子叶外植体转化受体系统的农杆菌介导的遗传转化方法。本发明首先利用高浓度TDZ（噻苯隆）溶液对子叶外植体进行短期浸泡，然后再用低浓度的农杆菌菌液短期侵染子叶外植体，这样可以大大提高农杆菌的遗传转化率；将侵染后的外植体进行再生培养，对抗性芽直接进行PCR鉴定后就可以进行微嫁接，获取转基因植株。本发明大大提高了遗传转化率，而且显著缩短了获得完整转化植株的周期。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 杆菌 麻疯树 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】：
一种农杆菌介导的麻疯树遗传转化方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.获取麻疯树子叶外植体，将子叶外植体在20 mg/L高浓度TDZ溶液中浸泡40分钟后取出；S2.将子叶外植体置于无激素的预培养基上培养1～4天后，用OD600为0.1～0.2的低浓度农杆菌菌液侵染子叶外植体30秒；S3.将侵染后的子叶外植体置于无抗生素和激素的共培养基上培养1～6天后，再将子叶外植体置于无激素的筛选和恢复培养基上培养，获得抗性芽；S4.将抗性芽进行伸长培养，对伸长后的小芽或芽条进行PCR检测，以PCR检测结果为阳性的小芽或芽条为接穗进行微嫁接，获得遗传转化苗。
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