[发明专利]针对食品中的沙门氏菌和志贺氏菌的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法

摘要

本发明适用于食品微生物安全检测领域，提供了一种针对食品中的沙门氏菌和志贺氏菌的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法。本发明的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法通过组合利用沙门氏菌和志贺氏菌的种属特异性鉴别基因，可实现检测覆盖范围广、特异性强且灵敏度高的技术效果，并且检测耗时短、操作较简单、设备要求低、通量高，可以节省大量的人力、物力和财力，适合快速检测的要求，易于在实际生产中推广应用。

主权项

1.一种对食品中的沙门氏菌和志贺氏菌进行检测的方法，所述方法包括以下步骤：a)从所述食品中获取模板DNA的前处理步骤；b)使用多重PCR检测用引物组或包含所述多重PCR检测用引物组的多重PCR检测用试剂盒对所述模板DNA进行多重PCR扩增的步骤；c)对扩增产物进行检测的步骤，从而对所述食品中沙门氏菌和志贺氏菌的存在及含量进行分析，其中，所述引物组包括如下引物对：沙门氏菌检测用引物对以及志贺氏菌检测用引物对：所述沙门氏菌检测用引物对为：invA基因扩增用引物对：invA‑F：TTGACGAGCTTTATCATTGTCTG；invA‑R：ACGTCTTTTTCTCTTGGTGCC，和/或hilA基因扩增用引物对：hilA‑F：TGAATTACGCTCACAACACCTG；hilA‑R：TGCTAAGCAACCAGATTACGATG，所述志贺氏菌检测用引物对为：ipaH基因扩增用引物对：ipaH‑F：CTCACATGGAACAATCTCCG；ipaH‑R：TCATTCTCTTCACGGCTTCTG，和/或ipaB基因扩增用引物对：ipaB‑F：TGAAAGCAGTCATTGAACCC；ipaB‑R：TGAGAGTTGGACATTGAGGC，并且其中，在步骤b)中，所述多重PCR扩增的反应体系为：以总体积为25μL计，加入浓度为1pg/μL～100ng/μL的模板DNA 1μL；所述多重PCR扩增的反应条件为：95℃预变性2min；94℃变性15s，55℃退火20s，72℃延伸30s，共进行35个循环；72℃延伸7min。