[发明专利]一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法有效
| 申请号： | 201410279995.X | 申请日： | 2014-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN104049026A | 公开（公告）日： | 2014-09-17 |
| 发明（设计）人： | 阮海华;张西轩;王素英;李晔 | 申请（专利权）人： | 天津商业大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 肖莉丽 |
| 地址： | 300134*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法，以利用胶原酶对胶原蛋白的特异性降解作用对胶原酶进行酶谱分析。电泳过程中所采用的凝胶为在10％SDS-PAGE凝胶中添加质量体积比浓度为0.1％的Ⅰ型胶原蛋白。凝胶的处理过程为：电泳结束后先将凝胶用洗脱液振荡洗脱，随后用漂洗液振荡漂洗，最后将凝胶用孵育液在37℃下静置孵育12h；孵育结束后将凝胶先经考马斯亮蓝R-250染色液染色1h，再经脱色液室温振荡脱色直至透明条带清晰。该方法将Ⅰ型胶原蛋白配制到SDS-PAGE凝胶中,凝胶中Ⅰ型胶原蛋白的终浓度为0.1％，在该底物浓度下，胶原酶负染条带以及标准蛋白质标准条带能够同时在凝胶上显色，填补了胶原酶酶谱检测领域的技术空白。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 筛选 微生物 胶原酶 方法 | ||
【主权项】：
一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法，包括电泳和凝胶的处理步骤，其特征在于，所述电泳过程中所采用的凝胶为在10％SDS‑PAGE凝胶中添加质量体积比浓度为0.1％的Ⅰ型胶原蛋白。
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