[发明专利]离心沉降辅助植物转基因的方法

摘要

一种离心沉降辅助植物转基因的方法是：将植物受体材料与农杆菌混合后在合理的转速下进行离心沉降处理，最终获得阳性转化子。离心沉降不仅可以增加受体材料的创伤面积，而且使农杆菌在离心力作用下深入到受体材料内部，显著提高了植物转基因效率。

主权项

一种离心沉降辅助植物转基因的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，通过植物组织培养技术，得到无菌的植物材料；步骤二，从获得的无菌植物材料中切取受体部位，作为植物受体材料；步骤三，将包含有目的基因的农杆菌活化到转化状态后，在5000‑10000rpm条件下离心并重悬，得到农杆菌重悬液；步骤四，把植物受体材料浸泡到农杆菌重悬液中，再次进行离心处理；步骤五，将步骤四中离心处理后的材料转移到无菌玻璃器皿中静置15‑20分钟；步骤六，静置时间结束后，把感染后的植物材料从玻璃器皿中取出来，用无菌滤纸吸干残留的菌液，然后转移到共培养基中共培养；步骤七，共培养结束后，将感染过的植物受体材料在选择压力下进行筛选，最终获得阳性转化子；步骤四中所述的离心处理是，在25℃下，5000‑8000rpm离心5‑10min；步骤三中所述的转化状态，是指农杆菌液的OD值达到0.5‑0.7；步骤三中所述的重悬，是指将农杆菌在感染之前进行离心沉降后弃上清，然后用植物液体培养基把细菌重新悬浮起来。