[发明专利]一种用于制备肝细胞靶向转递小干扰RNA的方法有效
| 申请号： | 201410283413.5 | 申请日： | 2014-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN104087574B | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 武文斌;巴剑波;陈双红;郝蕙玲;孙锦程;徐雄利;吕鸿雁 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军海军医学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/113 |
| 代理公司： | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人： | 王裕 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生命科学领域，具体涉及一种用于制备肝细胞靶向转递小干扰RNA的方法。本发明公开了一种用于制备肝细胞靶向转递小干扰RNA的方法，反应底物包括乳糖酸或半乳糖衍生物、末端氨基修饰RNAi多核苷酸和EDC，其中，乳糖酸或半乳糖衍生物作为耦合反应的羧基供体和靶向耦合物的半乳糖基供体，末端氨基标记RNAi多核苷酸作为耦合反应的伯氨基供体，EDC作为零长度交联剂。本发明所公开的方法操作简便、产率高、活性好，实现了小干扰RNA与肝细胞特异性配基―半乳糖基的共价耦合，耦合物被肝细胞特异性摄取后，表现出针对目标基因的沉默活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 制备 肝细胞 靶向 转递 干扰 rna 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于制备肝细胞靶向转递小干扰RNA的方法，反应底物包括乳糖酸或半乳糖衍生物、末端氨基修饰RNAi多核苷酸和EDC，其中，乳糖酸或半乳糖衍生物作为耦合反应的羧基供体和靶向耦合物的半乳糖基供体，末端氨基标记RNAi多核苷酸作为耦合反应的伯氨基供体，EDC作为零长度交联剂，其特征在于所述方法在0.05M～0.1M MES缓冲液pH 4.5中进行，乳糖酸与末端氨基标记RNAi多核苷酸摩尔比例为1∶1～2000∶1，EDC与乳糖酸摩尔比例为1∶1～100∶1，所述RNAi多核苷酸为siRNA。
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