[发明专利]早期膀胱癌的多靶标检测方法

摘要

本发明早期膀胱癌的多靶标检测方法，属于生物检测技术领域。包括下述步骤：(1)、提取患者尿液中所含的DNA；(2)、对步骤(1)获得的DNA进行亚硫酸氢盐转化处理；(3)、通过甲基化特异性荧光定量PCR对EOMES、GDF15、NID2、PCDH17、POU4F2、TCF21、ZNF154这七个标志物基因进行检测，以ALU‑C4作为内参基因；(4)、以步骤(3)中的CT值来判定患者是否为早期膀胱癌。本发明具有以下优点：采用多个生物标志物基因联合检测，在每个标志物的特异性都比较高的前提下，使用多个标志物联用的方式来提高检测的敏感性和特异性；根据多个生物标志物基因设计了特异性引物。

主权项

用于检测多个标志物基因的试剂在制备用于检测早期膀胱癌试剂的应用，包括下述步骤：(1)、提取膀胱癌患者尿液中所含的DNA；(2)、对步骤(1)获得的DNA进行亚硫酸氢盐转化处理；(3)、通过甲基化特异性荧光定量PCR对EOMES、GDF15、NID2、PCDH17、POU4F2、TCF21、ZNF154这七个标志物基因进行检测，以ALU‑C4作为内参基因；(4)、在膀胱癌患者中步骤(3)所述的七个标志物基因中至少一个标志物基因的相对甲基化水平值高于其检出限；所述步骤(3)中的针对ALU‑C4的上游引物序列为SEQ No.1，下游引物序列为SEQ No.2；针对EOMES的上游引物序列为SEQ No.3，下游引物序列为SEQ No.4；针对GDF15的上游引物序列为SEQ No.5，下游引物序列为SEQ No.6；针对NID2的上游引物序列为SEQ No.7，下游引物序列为SEQ No.8；针对PCDH17的上游引物序列为SEQ No.9，下游引物序列为SEQ No.10；针对POU4F2的上游引物序列为SEQ No.11，下游引物序列为SEQ No.12；针对TCF21的上游引物序列为SEQ No.13，下游引物序列为SEQ No.14；针对ZNF154的上游引物序列为SEQ No.15，下游引物序列为SEQ No.16。