[发明专利]运动发酵单胞菌RED重组系统表达质粒及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一类能在运动发酵单胞菌中应用RED重组系统的质粒pSUZM1a-RED、pSUZM2a-RED和pSUZM3a-RED及其构建方法与应用。质粒pSUZM1a-RED、pSUZM2a-RED和pSUZM3a-RED都包含卡那霉素筛选标记基因、组成型启动子Ppdc和RED基因。其区别在于质粒pSUZM1a-RED包含运动发酵单胞菌染色体上复制起点oriC、质粒pSUZM2a-RED包含运动发酵单胞菌内源性质粒pZZM401上的复制蛋白序列、质粒pSUZM3a-RED包含运动发酵单胞菌内源性质粒pZZM402上的复制蛋白序列。当把RED表达质粒转入Z. mobilis时，在敲入的筛选标记基因同源臂为60bp时，敲入基因能够准确地替换靶基因。运动发酵单胞菌RED系统能够对运动发酵单胞菌的基因组进行准确的编辑，具有很好的应用前景。

主权项

一类能在运动发酵单胞菌中应用的RED重组系统表达质粒pSUZM1a‑RED、pSUZM2a‑RED和pSUZM3a‑RED，包含运动发酵单胞菌内源性基因启动子、筛选标记基因和RED重组系统基因（exo、bet、gam）。