[发明专利]基于核酸序列的蛋白质相互作用检测方法无效
| 申请号： | 201410338899.8 | 申请日： | 2014-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN104099418A | 公开（公告）日： | 2014-10-15 |
| 发明（设计）人： | 吴家睿;梁治;骆斯伟 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 王旭 |
| 地址： | 230026 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及基于DNA序列检测蛋白质间相互作用的方法(称为蛋白质二聚化足迹法，Protein Dimerization footprinting，简称PDf)，试剂盒及其用途。基本原理是基于目的蛋白质间相互作用强度对其融合的DNA结合结构域与相应特异性DNA序列间结合动力学的影响，实现将目的蛋白质间相互作用由相应特异性DNA序列表示，而目的蛋白质间相互作用强度则由该特异性DNA序列的拷贝数给出。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 核酸 序列 蛋白质 相互作用 检测 方法 | ||
【主权项】：
获取蛋白质间相互作用信息的方法，其包括如下步骤：(1)在宿主细胞中表达融合有DNA结合结构域的目的蛋白质，所述DNA结合结构域二聚化时对相应特异性DNA序列的亲和力显著高于单体时；(2)在生理状态下用交联剂处理，将宿主细胞中的目的蛋白质二聚体和DNA交联形成复合体；(3)将DNA打碎成小片段；(4)分离提取所述小片段，并用DNase I消化；(5)使用去交联剂处理，将步骤(4)的产物去交联，并纯化得到DNA片段；(6)检测步骤(5)得到的DNA片段。
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