[发明专利]一种检测脂肪酶酶活的荧光法有效
| 申请号： | 201410359221.8 | 申请日： | 2014-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN104597006B | 公开（公告）日： | 2018-02-06 |
| 发明（设计）人： | 田丹碧;汤燕;黄和;江凌;张卫;许智玲 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211816 江苏省南京市浦*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测脂肪酶酶活的荧光法。本发明利用了天然物质姜黄素具有荧光的特点，将姜黄素作为荧光信号元件，同时吐温既作为脂肪酶的底物又作为包裹信号分子姜黄素的载体。发展出一种具有成本低、操作简单、方便快捷的特点的荧光分析法。本发明采用的吐温具有两亲性，无需乳化过程，且信号分子姜黄素商业上可获得，简化了操作过程，适宜推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 脂肪酶 荧光 | ||
【主权项】：
一种检测脂肪酶酶活的荧光法，其特征在于，利用了天然物质姜黄素具有荧光的特点，将姜黄素作为荧光信号元件，同时吐温既作为脂肪酶的底物又作为包裹信号分子姜黄素的载体；具体包括如下步骤：(1)分别向2mL A、B离心管中加入吐温溶液；(2)向步骤(1)中得到的A、B离心管溶液中加入由甲醇溶液配制的姜黄素溶液进行包裹；(3)向步骤(2)中得到的A、B离心管溶液分别加入缓冲溶液进行pH的调节；后向B离心管加入待测脂肪酶溶液，A离心管不需要加入待测脂肪酶溶液；混匀，调节反应温度，B离心管中的吐温溶液的胶束结构被脂肪酶水解，姜黄素暴露在缓冲溶液当中发生降解，检测A、B离心管溶液的荧光光谱，得到不同时间对应的荧光光谱，然后以荧光强度的差值ΔF505作为纵坐标，时间为横坐标，绘制脂肪酶酶活的动力学曲线。
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