[发明专利]一种制备人妊娠特异性糖蛋白9的方法有效
| 申请号： | 201410376676.0 | 申请日： | 2014-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN104151407B | 公开（公告）日： | 2016-11-23 |
| 发明（设计）人： | 杨磊;黄骁舾;王敏 | 申请（专利权）人： | 首都医科大学附属北京朝阳医院 |
| 主分类号： | C07K14/245 | 分类号： | C07K14/245;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;陈晓庆 |
| 地址： | 100020*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种制备人妊娠特异性糖蛋白9的方法。该方法包括如下步骤：(1)构建重组菌：将人PSG9蛋白的编码基因导入宿主大肠杆菌中，得到重组菌；(2)重组菌诱导培养：将重组菌用IPTG进行诱导培养，IPTG在菌液中的浓度为3uM，诱导培养的温度为30℃，得到诱导后菌体；(3)蛋白纯化：将诱导后菌体破碎，取上清；将上清用镍柱进行纯化，纯化过程中使用的洗脱液是含有40nM咪唑的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即得到人PSG9蛋白。实验结果表明，本发明方法制备得到的人PSG9蛋白的纯度高，可达27.3mg/L，为后续PSG9在癌症中作用机制研究以及获得高纯度的单克隆抗体奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 妊娠 特异性 糖蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种制备人PSG9蛋白的方法，包括如下步骤：(1)构建重组菌：将人PSG9蛋白的编码基因导入宿主大肠杆菌中，得到重组菌；(2)重组菌诱导培养：将重组菌用IPTG进行诱导培养，IPTG在菌液中的浓度为3μM，诱导培养的温度为30℃，得到诱导后菌体；(3)蛋白纯化：将诱导后菌体破碎，取上清；将上清用镍柱进行纯化，纯化过程中使用的洗脱液是含有40nM咪唑的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即得到人PSG9蛋白；所述人PSG9蛋白的编码基因如SEQ ID NO.1中第1‑1278位核苷酸的DNA分子所示。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于首都医科大学附属北京朝阳医院，未经首都医科大学附属北京朝阳医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410376676.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
