[发明专利]一种区分蕨麻和鹅绒委陵菜的方法有效
申请号: | 201410380396.7 | 申请日: | 2014-08-04 |
公开(公告)号: | CN104099426A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
发明(设计)人: | 李军乔;富贵;白世俊;韦梅琴;包锦渊;闫淑艳 | 申请(专利权)人: | 青海民族大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 深圳冠华专利事务所(普通合伙) 44267 | 代理人: | 诸兰芬 |
地址: | 810000 青海省西宁市八*** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | 本发明公开一种区分蕨麻和鹅绒委陵菜的方法,其特征在于,包括如下步骤:提取样品DNA溶液;获取样品DNA条形码序列:DNA溶液按照预定的PCR体系在预定的循环程序下,进行PCR扩增,得到样品的DNA条形码序列;将PCR扩增产物采用1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,目标条带回收,进行测序,将测序所得到的ABI序列文件用DNAMAN软件进行拼接和人工校正,得到ITS、Trn-L和Matk的核苷酸序列。将样品的ITS、Trn-L和Matk的核苷酸序列与参照序列进行对比,判别样品所属。采用本发明的设计方案,使用DNA鉴定技术对蕨麻和鹅绒委陵菜在分子水平进行鉴定,准确率高,结果可靠。 | ||
搜索关键词: | 一种 区分 鹅绒 委陵菜 方法 | ||
【主权项】:
一种区分蕨麻和鹅绒委陵菜的方法,其特征在于,包括如下步骤:a.提取样品DNA溶液:采用快捷型植物基因组DNA提取试剂盒进行DNA提取,得到样品DNA溶液;b.获取样品DNA条形码序列:以步骤a提取的DNA溶液为模板,按照预定的PCR体系在预定的循环程序下,ITS序列采用正向引物(5'‑CGTAACAAGGTTTCCGTAGGT‑3')和反向引物(5'‑TGGTTCACGGGATTCTGC‑3')进行PCR扩增;Trn‑L序列采用正向引物(5'‑CGAAATCGGTAGACGCTACG‑3'),和反向引物(5'‑GGGGATAGAGGGACTTGAAC‑3')进行PCR扩增;Matk序列采用采用正向引物(5'‑TAATTTACGATCAATTCATTC‑3')和反向引物(5'‑GTTCTAGCACAAGAAAGTCG‑3')进行PCR扩增,即得到样品的DNA条形码序列;将PCR扩增产物采用1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,目标条带回收,进行测序,将测序所得到的ABI序列文件用DNAMAN软件进行拼接和人工校正,得到ITS、Trn‑L和Matk的核苷酸序列;c.将样品的ITS、Trn‑L和Matk的核苷酸序列与参照序列进行对比,判别样品所属。
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