[发明专利]一种T5核酸外切酶在大肠杆菌中的制备方法在审
申请号: | 201410382116.6 | 申请日: | 2014-08-05 |
公开(公告)号: | CN104152426A | 公开(公告)日: | 2014-11-19 |
发明(设计)人: | 孙启明;徐卫国;张亚;陈远 | 申请(专利权)人: | 孙启明 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 无 | 代理人: | 无 |
地址: | 221000 江苏省徐州市鼓楼*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明是一种T5核酸外切酶(T5 Exonuclease)在大肠杆菌中的制备方法,属生物化学领域。本发明通过载体构建将T5核酸外切酶基因和肠激酶酶切位点克隆到含GST标签的pGEX载体中,在低温和低浓度IPTG条件下诱导T5核酸外切酶融合蛋白表达,蛋白的表达量达到15%。通过GST亲和层析、EK酶切以及离子交换层析纯化,得到了不带任何标签的T5核酸外切酶,比活力约为8000units/mg。 | ||
搜索关键词: | 一种 t5 核酸外切酶 大肠杆菌 中的 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种T5核酸外切酶在大肠杆菌中的制备方法,其特征在于所述的T5外切酶的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。
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