[发明专利]一种河蚬抗氧化肽及其制备方法

摘要

本发明公开了一种河蚬抗氧化肽及其制备方法。所述的河蚬抗氧化肽是利用复合酶微波协同可控酶解技术对河蚬肉进行深度开发，制备出新型且具有抗氧化功效的抗氧化肽。本发明提高了河蚬资源的利用率，为河蚬的深度加工提供一条新的途径，提升河蚬附加值，促进农民增收，同时在促进河蚬养殖业的发展方面将取得更好的社会和经济效益。

主权项

一种河蚬抗氧化肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）微波协同复合酶协同酶解河蚬肉，得酶解物；（2）超滤去除酶解物中大分子蛋白；（3）将滤过液依次通过葡萄糖凝胶G‑50和G‑25进行分离纯化，冷冻干燥，即得；步骤（1）具体为：取新鲜河蚬肉，或速冻河蚬肉经流水解冻沥干后，按重量比1:4的料液比加水，采用低温超高压连续流细胞破碎仪进行匀浆，调节pH至6.8～7.2，添加河蚬肉质量的1.0% ~1.2%复合蛋白酶，在微波功率800W，55~60℃条件下酶解25~30min，酶解完成后100℃下灭酶15 ~20min，冷却到室温，4000r/min 离心20~25min，取上清液，得酶解物；所述的复合蛋白酶为中性蛋白酶与风味蛋白酶按质量比2~3:1得到的混合物；步骤（2）采用超滤膜切割分子量为3KD的杯式过滤器过滤；步骤（3）具体为：将步骤（2）得到的滤过液通过装有葡聚糖凝胶G‑50的玻璃层析柱，以蒸馏水为洗脱液，流速为0.5~1mL/min，通过自动部分收集器分管收集，每5min 收集一管，每管3mL，分别测定毎管的A280nm值，以管数为横坐标，毎管的A280nm值为纵坐标作图，得到含有5个峰值的洗脱曲线，合并同一分离峰的洗脱液，得到5个不同的组分，将总抗氧化能力最强的组分继续通过装有葡聚糖凝胶G‑25的玻璃层析柱，以蒸馏水为洗脱液，流速为0.5~1mL/min，通过自动部分收集器分管收集，每5min 收集一管，每管3mL，分别测定每管的A280nm值，以管数为横坐标，每管的A280nm值为纵坐标作图，得到含有3个峰值的洗脱曲线，合并同一分离峰的洗脱液，得到3个不同的组分；分别测定3个组分羟自由基清除能力和DPPH自由基清除能力，收集清除自由基能力最强的洗脱液组分冷冻干燥，即为河蚬抗氧化肽。