[发明专利]抑制Six2基因表达的shRNA、慢病毒表达载体及其构建方法在审
| 申请号： | 201410392405.4 | 申请日： | 2014-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN104195137A | 公开（公告）日： | 2014-12-10 |
| 发明（设计）人： | 高锦;高殿帅;亢小玉;李俐;孙申;张宝乐;李亨;姚瑞芹 | 申请（专利权）人： | 徐州医学院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867;C12N15/66;C12N7/00;C12N5/07 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 傅婷婷;徐冬涛 |
| 地址： | 221004 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了抑制Six2基因表达的shRNA、慢病毒表达载体及其构建方法。抑制Six2基因表达的shRNA，序列为SEQ ID NO.2。一种Six2基因shRNA敲除慢病毒表达载体，将所述的shRNA插入载体质粒pLVX-EF1α-IRES-Puro的BamH I及EcoR I酶切位点所得。将所述的慢病毒载体质粒和包装质粒pLP1及pLP/VSVG转染293T细胞获得慢病毒pLV-shSix2。本发明筛选得到对Six2基因表达具有明显抑制作用的shRNA，并在此基础上成功构建了敲减Six2的慢病毒表达载体及慢病毒，获得了稳定敲除Six2基因的MES23.5细胞株，为进一步研究Six2的功能打下了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 抑制 six2 基因 表达 shrna 病毒 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
抑制Six2基因表达的shRNA，其特征在于选自序列如SEQ ID NO.2所示的shSix2‑2、序列如SEQ ID NO.4所示的shSix2‑4或序列如SEQ ID NO.5所示的shSix2‑5中的任意一条。
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