[发明专利]实时PCR检测单核苷酸多态性的方法及其应用在审
申请号: | 201410397469.3 | 申请日: | 2014-08-13 |
公开(公告)号: | CN104164506A | 公开(公告)日: | 2014-11-26 |
发明(设计)人: | 罗晓腾;郭永超;廖玉声 | 申请(专利权)人: | 深圳联合医学科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人: | 张全文 |
地址: | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种实时PCR检测单核苷酸多态性的方法,其中PCR中采用的聚合酶为具有瓣状核酸内切酶活性的聚合酶;采用的荧光探针的5’端修饰有第一荧光基团、3’端修饰第二荧光基团;且荧光探针具有与待测核酸单核苷酸多态性位点的碱基互补的对应碱基,该对应碱基沿5’往3’方向的下一个碱基上标记有淬灭基团;荧光探针的5’端至所述对应碱基的序列与待测核酸非互补。本发明的方法设计能够形成瓣状结构的荧光探针进行特异性的荧光标记,并结合具有瓣状核酸内切酶活性的聚合酶,据所实时PCR测得的荧光的强度,即可判断核酸样本中的目标核酸的SNP位点上的碱基的类型;可准确地区分SNP位点上的不同碱基,大大地提高了进行SNP检测的准确性。 | ||
搜索关键词: | 实时 pcr 检测 核苷酸 多态性 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种实时PCR检测单核苷酸多态性的方法,其特征在于,PCR过程中包括的聚合酶和荧光探针如下:所述聚合酶为具有瓣状核酸内切酶活性的聚合酶;所述荧光探针的5’端修饰有第一荧光基团、3’端修饰第二荧光基团;且所述荧光探针具有与待测核酸中单核苷酸多态性位点的碱基互补的对应碱基,所述对应碱基沿5’往3’方向的下一个碱基上标记有淬灭基团;所述荧光探针的5’端至所述对应碱基的序列与待测核酸非互补。
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