[发明专利]一种葡萄果皮RNA的提取方法

摘要

本发明公开了一种葡萄果皮RNA的提取方法，属生物技术领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种成本较低、效率较高的葡萄果皮RNA的提取方法。本发明所提取的葡萄果皮RNA的方法包括如下步骤：称取0.2g葡萄果皮，液氮研磨后加入预热的裂解液和β-巯基乙醇，涡旋后水浴，加等体积氯仿/异戊醇(24/1)震荡后离心，取上清加等体积的氯仿/异戊醇(24/1)后再离心，重复2次，加入沉淀剂沉淀后离心，乙醇洗涤并回收RNA。

主权项

一种葡萄果皮RNA的提取方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将待用的CTAB裂解液放置在65‑70℃水浴中预热10min；(2)取0.2g葡萄果皮，在研钵中用液氮研磨成粉末状后，盛入2ml离心管内；(3)吸取1ml预热过的CTAB裂解液到2ml离心管内，加入20μlβ‑巯基乙醇，缓慢震荡混匀后，放回到65‑70℃水浴中，水浴45‑50min，期间反复颠倒混匀2‑3次；(4)水浴完成后，将上述样品液加入等体积的氯仿/异戊醇并涡旋混合，12000rpm，4℃离心10min；(5)吸取一定量上清液至新的2ml离心管内,重复步骤(4)抽提二次；(6)吸取一定量上清液至一新的1.5ml离心管中，加入‑20℃预冷的LiCl溶液，‑20℃下沉淀过夜；(7)4℃，12000rpm离心20‑30min，弃上清，用500μl70％乙醇洗涤沉淀2次，4℃，12000rpm离心30s；(8)用500μl100％乙醇洗涤沉淀，4℃，12000rpm离心30s；(9)吸干残留上清，干燥15min后，用30μlDEPC水溶解RNA。