[发明专利]HPLC同时测定诺尼果汁中车叶草苷酸和去乙酰车叶草苷酸含量的方法

摘要

本发明涉及一种HPLC同时测定诺尼果汁中车叶草苷酸和去乙酰车叶草苷酸含量的方法。具体技术方案是：分别制备标准品溶液和样品溶液，用HPLC法进行梯度洗脱，同时测定诺尼果汁中车叶草苷酸和去乙酰车叶草苷酸含量。本发明方法简便、可靠、迅速，灵敏度高，重现性好，可以将诺尼果汁中车叶草苷酸和去乙酰车叶草苷酸与干扰物质很好的分离，并同时测定其含量，对诺尼果汁功效性成分的研究具有重要意义。

主权项

一种采用HPLC法检测车叶草苷酸和去乙酰车叶草苷酸含量的方法，其特征是：按照如下步骤对诺尼果汁中车叶草苷酸和去乙酰车叶草苷酸同时进行定性和定量分析：(1) 混合标准品溶液制备称取车叶草苷酸对照品5 mg，去乙酰车叶草苷酸对照品25 mg，置于10 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品储备液；(2) 样品制备取20 mL诺尼果汁10000 r/m离心5 min，吸取上清液 10 mL于100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；(3) 高效液相色谱分离检测条件采用C18反相色谱柱，以流动相A 磷酸水溶液；流动相B乙腈，采用梯度洗脱，采用紫外检测器检测，柱温为30 ‑ 40℃，流速为0.2‑1.2 mL / min；(4) 样品定性和定量分析采用系列混合标准品溶液按照步骤(1)进行配制，按步骤(3)色谱条件进样；以峰面积y对质量浓度 x进行线性回归，得到车叶草苷酸和去乙酰车叶草苷酸标准品的回归方程；每个样品按步骤(2)进行前处理后，按步骤(3)色谱条件分别进样分析，样品峰与标准品保留时间比对定性，样品峰面积代入相对应的标准曲线回归方程定量。