[发明专利]将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法有效
| 申请号： | 201410433182.1 | 申请日： | 2014-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN105372318B | 公开（公告）日： | 2018-01-05 |
| 发明（设计）人： | 国前;于金明;廖湘鲁 | 申请（专利权）人： | 山东省肿瘤医院 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;G01N15/14 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人： | 赵妍 |
| 地址： | 250117 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法，取待检测的细胞团加入4％的多聚甲醛预固定1‑6秒钟，终止固定；将预固定后的细胞团中加入0.2％Triton X‑100 200μl进行细胞打孔5‑15分钟；将打孔后的细胞用PBS冲洗后，将冲洗后的细胞中加入电泳缓冲液制成细胞悬液；恒压条件下进行电泳，电泳完成后收集电泳缓冲液，将收集到的电泳缓冲液用70％的乙醇固定，固定22‑26h。本发明采用了二次固定的方法，第一次固定时使用4％的多聚甲醛预固定1‑6秒钟，使细胞膜的表面蛋白质变性，利于后续的打孔，保证细胞在打孔的过程中不破裂；若不进行第二次固定，细胞在进行后续的检测过程中会出现破裂，保证检测结果的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 原位 电泳 分析 结合 固定 方法 | ||
【主权项】：
一种将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取待检测的细胞团加入4%的多聚甲醛预固定1‑6秒钟，终止固定；（2）将预固定后的细胞团中加入0.2% Triton X‑100 200μL进行细胞打孔5‑15分钟；（3）将打孔后的细胞用PBS冲洗后，将冲洗后的细胞中加入电泳缓冲液制成细胞悬液；（4）恒压条件下进行电泳，电泳完成后收集电泳缓冲液，将收集到的电泳缓冲液用70%的乙醇固定，固定22‑26h。
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