[发明专利]一种30分钟内提取土壤微生物基因组DNA的试剂盒在审
申请号: | 201410449878.3 | 申请日: | 2014-09-05 |
公开(公告)号: | CN104178481A | 公开(公告)日: | 2014-12-03 |
发明(设计)人: | 王清水;余彦 | 申请(专利权)人: | 福建师范大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 林文弘 |
地址: | 350117 福建省福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明提供一种30分钟内提取土壤微生物基因组DNA的试剂盒,本试剂盒能够在三十分钟内快速、高效地提取纯度高、浓度高的土壤微生物基因组DNA,克服了传统土壤微生物基因组DNA提取耗时长以及需要进一步纯化的缺点。利用本试剂盒提取得到的土壤微生物基因组DNA无需进一步纯化,便能直接用于下游实验。本试剂盒主要包括土壤样品的前处理,以及土壤微生物基因组DNA的提取和纯化。本方法耗时短,效率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 30 分钟 提取 土壤 微生物 基因组 dna 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种三十分钟内快速提取土壤微生物基因组DNA的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括:(1)Buffer A溶液的配置:pH=5‑6、0.5‑2M Tris‑HCl ;(2)Buffer B溶液的配置:0.1‑0.3M Al2(SO4)3 ;(3)Buffer C溶液的配置:3‑5M NaOH;(4)Buffer D溶液的配置:pH=7‑9、0.1‑0.2M Tris‑HCl;(5)Buffer E溶液的配置:300‑350μl、10wt.%SDS;(6)Buffer F溶液的配置:称取2‑3g LiCl,1‑2g Tris,3‑4g EDTA,加入双蒸水溶解并调节至pH=7.5‑8.5,定容至100ml;(7)去蛋白液溶液配制:4‑6M盐酸胍,15‑25 mM Tris‑HCl,pH6.5‑7.0,使用前加入乙醇,乙醇浓度为35‑40wt.%;(8)漂洗液溶液配制:15‑25mM NaCl,1‑3mM Tris‑HCl,pH7.0‑8.0;(9)洗脱液溶液配制:5‑15mM Tris‑HCl,pH8.0‑9.0。
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