[发明专利]一种闪蒸气相色谱-质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法

摘要

本发明公开了一种闪蒸气相色谱-质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法，所述方法为：将北五味子和南五味子粉末装入裂解器中，将裂解器置于气相色谱仪进样口处，当裂解器温度达到300-350℃时进样，采用质谱标准谱库对蜂胶化学成分进行定性，然后选取特征峰得到特征成分，建立指纹图谱数据库，然后利用统计分析将待鉴别样品归类为北五味子或南五味子。闪蒸气相色谱采用固体样品直接进样，无溶剂使用，故操作简便，环保；开发闪蒸色谱-质谱方法对五味子样品进行定性、定量检测，能够有效节省实验时间、简化实验步骤，快速评价五味子的品种；该检测技术可以推广到五味子鉴别领域，对五味子质量控制具有十分深远的意义。

主权项

一种闪蒸气相色谱‑质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)取产地不同的北五味子和南五味子样品，北五味子和南五味子分别各取5～15个样品，一共取n个样品；n为整数，10≤n≤30；(2)各样品分别烘干、研磨得五味子粉末，每种样品的五味子粉末分别装入裂解器中，将裂解器置于气相色谱仪进样口处，当裂解器温度达到300‑350℃时进样，用气相色谱‑质谱联用仪检测，得到气相色谱图和质谱图；采用质谱标准谱库对五味子化学成分进行定性；所述气相色谱条件为：色谱柱为弱极性柱，升温程序为初温50℃，以5～10℃/min速率升到300℃，保持5～15min；进样口温度为280～320℃，检测器温度为280～320℃，分流比30～50:1；载气为氮气或氦气，流速1.0mL/min；质谱条件为：电子轰击离子源，离子源温度230～250℃，传输线温度250～300℃，电离能量70eV，离子扫描范围40～550m/z；裂解器条件：裂解炉温度：300‑350℃；裂解器与气相色谱仪接口温度300～350℃；(3)按照气相色谱图的流出时间和质谱定性结果，将各样品气相色谱图按照流出时间的先后顺序依次分为四个区域：A区、B区、C区、D区，其中A区为小分子化合物区，B区为萜类化合物区，C区为脂肪酸和脂肪酸酯区，D区为木脂素区；所有北五味子样品在B区和D区中各选取其中峰面积最高的5‑10个成分，所有南五味子样品在B区和D区中各选取其中峰面积最高的5‑10个成分，取上述北五味子与南五味子选取的所有成分的并集，得到M个特征成分；M为整数，10≤M≤40；所述A区为小分子化合物区，所述小分子化合物是指分子量在200以下的胺类、酸类、酸酐类、醇类、酯类和醛类的化合物；所述B区为萜类化合物区，所述萜类化合物包括萜烯化合物和含氧萜烯化合物；所述C区为脂肪酸和脂肪酸酯区，所述脂肪酸是指C16～C20的脂肪酸，所述脂肪酸酯是指C18～C36的脂肪酸酯；(4)待鉴别的x个五味子样品按照步骤(2)操作，得到气相色谱图和质谱图；并进行定性和定量分析；x为整数，1≤x≤10；(5)取n个已知样品和x个待鉴别样品的气相色谱图，取每个样品的M个特征成分的特征峰相对于其五味子甲素峰的相对峰面积数据，得到M×(n+x)的数据库，输入SPSS统计软件，进行主成分分析、聚类分析或相似度计算，根据统计分析结果将待鉴别样品归类为北五味子或南五味子。