[发明专利]基于锰过氧化物酶的工程菌及其实现方法在审
| 申请号： | 201410462406.1 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104232555A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 周培;冯海玮;孙玉静;支月娥 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王毓理;王锡麟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种基因工程领域的基于锰过氧化物酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和聚组氨酸标签的引物进行PCR扩增得到编码锰过氧化物酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得锰过氧化物酶过表达重组菌株。本发明针对现有技术存在的由于锰过氧化物酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成，此外本发明通过在表达重组蛋白C端添加聚组氨酸标签的方法，提高蛋白活性的同时也保证了纯化后锰过氧化物酶的纯度；此外，本发明通过载体信号肽实现了目的蛋白的周质空间表达，提高了锰过氧化物酶的活性。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 过氧化物 工程 及其 实现 方法 | ||
【主权项】：
一种锰过氧化物酶的工程菌，其特征在于，该工程菌为外源表达锰过氧化物酶的大肠杆菌； 所述的胞内锰过氧化物酶具体为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1锰过氧化物酶基因SG‐MNP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该锰过氧化物酶核苷酸序列为2226 bp，共编码741个氨基酸。
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