[发明专利]一种鸦胆子悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审

专利信息
申请号: 201410463275.9 申请日: 2014-09-12
公开(公告)号: CN104206278A 公开(公告)日: 2014-12-17
发明(设计)人: 杨存 申请(专利权)人: 南京通泽农业科技有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 210046 江苏省南京市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明研究了一种鸦胆子悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养等步骤,本发明方法所制备的鸦胆子悬浮细胞增殖率高,操作工艺简单可控,生长周期短,有利于鸦胆子有效成分的开发和利用。
搜索关键词: 一种 鸦胆子 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法
【主权项】:
 一种鸦胆子悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养,其主要步骤如下:(1)采取鸦胆子近芽处幼嫩的叶片,在超净工作台上对其进行消毒处理;(2)取步骤(1)消毒处理过的叶片接种入MS+NAA0.2mg/L+KT1.0mg/L+链霉素15mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,附加6.5g/L琼脂,30g/L蔗糖,光照强度1000lx,光期6h,暗期18h;(3)取步骤(2)中诱导出来的鸦胆子愈伤组织接入MS+ABA1.5mg/L+IAA0.3mg/L+GA31.5mg/L+1g/L柠檬酸,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,pH5.8,光照1000lx,温度25‑28℃;(4)取步骤(3)增殖后的愈伤组织筛选嫩绿松散的愈伤组织接入液体培养基MS+NAA0.05‑0.2mg/L+TDZ0.1‑0.5mg/L+3‑5mmol/L叶酸+500mg/L椰乳,5周后称重计算增殖率。
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