[发明专利]一种重组毕赤酵母工程菌及其在合成莱鲍迪苷A中的应用有效
申请号: | 201410477408.8 | 申请日: | 2014-09-18 |
公开(公告)号: | CN104232496B | 公开(公告)日: | 2017-06-06 |
发明(设计)人: | 林影;梁书利;毛国红;刘晓肖;王蓓蓓 | 申请(专利权)人: | 广州康琳奈生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12P19/56;C12R1/84 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司44202 | 代理人: | 王会龙 |
地址: | 510000 广东省广州市广州高科技产业*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组毕赤酵母工程菌及将其用作全细胞催化剂合成莱鲍迪苷A的方法。本发明的重组毕赤酵母工程菌是通过将含有如下外源DNA的表达载体线性化后转化毕赤酵母而获得编码蔗糖合成酶Sus1的DNA序列如SEQ ID NO.3所示,编码UDP‑糖基转移酶UGT76G1的DNA序列如SEQ ID NO.4所示。本发明的重组毕赤酵母工程菌实现Sus1的胞内表达和UGT76G1的表面展示表达,将本发明重组毕赤酵母用作全细胞催化剂可有效地用于合成莱鲍迪苷A,不仅提高了莱鲍迪苷A的合成效率和原料使用率、节约生产成本,并为莱鲍迪苷A的生产加工开辟新的工业化途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 酵母 工程 及其 合成 莱鲍迪苷 中的 应用 | ||
【主权项】:
一种重组毕赤酵母工程菌,其特征在于,所述重组毕赤酵母工程菌是通过将含有如下外源DNA的表达载体线性化后转化毕赤酵母而获得:编码蔗糖合成酶Sus1的DNA序列如SEQ ID NO. 3所示,编码UDP‑糖基转移酶UGT76G1的DNA序列如SEQ ID NO. 4所示;所述表达载体包括胞内表达载体和表面展示表达载体,所述胞内表达载体是将如SEQ ID NO. 3所示的DNA序列克隆至巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZA而获得胞内表达载体pPICZA‑Sus1;所述表面展示表达载体是将如SEQ ID NO. 4所示的DNA序列与锚定蛋白Gcw61编码基因融合后克隆至巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K而获得的表面展示表达载体pGCW61‑ UGT76G1。
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