[发明专利]一种抗氧化核桃多肽保健品的制备方法

摘要

本发明公开了一种抗氧化核桃多肽的制备方法，包括核桃粕的预处理‑核桃粕的均质‑核桃蛋白的提取‑酶解前处理‑酶解反应‑分离‑脱盐‑浓缩干燥得到核桃多肽产品，其中在酶解反应环节采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶四种酶按序、分时段加入，根据这四种酶对蛋白质分解为多肽、氨基酸作用的强弱、功能、协同等综合考虑，并使四种酶在各自最优的酶解条件下进行酶解。本发明所制备的核桃多肽还原能力表现为吸光度在0.4上下浮动，对羟自由基清除率可高达95%，对超氧阴离子自由基清除率可以达到39.5%，蛋白提取率可达到98.71%，核桃多肽的水解度可达到26.37%，与现有技术相比具有较大的提高和改善。

主权项

一种抗氧化核桃多肽的制备方法，其特征在于包括：（1）核桃粕的预处理：将核桃脱皮、脱油，得到脱脂核桃粕，经粉碎至74μm ‑150μm，其中，核桃脱油是通过CO2超临界萃取提油实现的；（2）核桃粕的均质：将粉碎后的核桃粕与水按重量比1:10‑20混合，在35MPa‑45MPa条件下均质，重复2‑4次，使核桃粕充分均质，得到核桃混悬液；（3）核桃蛋白的提取：先将上述核桃混悬液稀释5‑10倍，在85℃‑100℃下变性10 min‑15min，再用1mol/L的 NaOH溶液将其pH值调整为9‑11，在50℃‑55℃条件下碱溶1h‑2h，经离心取上清液，用0.5 mol/L 的HCl溶液将上清液的pH值调至5‑6，经离心，将收集的沉淀用NaHCO3 溶液调至中性后，经喷雾干燥得核桃蛋白；（4）酶解前处理：将核桃蛋白与水按重量比1:8‑15制备成核桃蛋白混悬液，在85℃‑95℃条件下保温10min‑20min，破坏蛋白质的结构利于其水解；（5）酶解反应：将上述核桃蛋白混悬液冷却至45℃‑55℃，先将pH值调节至9‑11加入3000‑4000u/g的碱性蛋白酶，酶解30min，然后将pH值调至8‑10加入5000‑6000u/g木瓜蛋白酶，继续酶解30min，再将pH值调至7‑8.5加入6000‑7000u/g中性蛋白酶，继续酶解30min，最后将pH值调至6‑7.5加入2000‑3000u/g菠萝蛋白酶进行酶解，3h‑5h后酶解反应的水解度基本不变时，迅速将核桃蛋白混悬液的温度调至90℃‑100℃，恒温15min‑20min后，停止酶解反应；（6）分离：将步骤（5）得到的酶解液pH值调至5‑6经离心取上清液，再将上清液经超滤膜超滤，得到含小分子多肽的核桃多肽溶液；（7）脱盐：选用强酸性阳离子树脂和强碱性阴离子树脂分别处理核桃多肽溶液；（8）浓缩干燥：将步骤（7）得到的核桃多肽溶液浓缩至原溶液的1/4‑1/3后，进行喷雾干燥，其中，是在‑0.07 MPa‑ ‑0.09MPa，50℃‑60℃的条件下通过旋蒸浓缩至原溶液的1/4‑1/3后，用喷雾干燥器在进口温度70℃‑85℃，出口温度170℃‑190℃，流量800mL/h‑1200mL/h的条件下进行喷雾干燥，得到核桃多肽粉。