[发明专利]一种联合检测禽流感H4和H6亚型的双色荧光定量PCR试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种联合检测禽流感H4和H6亚型的双色荧光定量PCR试剂盒及检测方法，能够实现同时检测出待测标本中是否含禽流感病毒H4亚型和禽流感病毒H6亚型两种病原体，并能够实时精确检测并对病毒进行定量，应用极为方便。由于引入了特异性扩增引物和荧光探针，使得检测的灵敏度和特异性得到很大程度的增强，从而避免了其他检测方法特异性不高、容易漏诊和误诊的问题，基于上述优点，该试剂盒适合在各级动物卫生监督所、动物疫病预防控制中心动物医院和各种动物疾病研究机构等大规模筛查的推广应用，具有广泛的应用前景。

主权项

一种联合检测禽流感H4和H6亚型的双色荧光定量PCR试剂盒，所述试剂盒包含：用于检测禽流感病毒H4亚型的引物和探针，其序列如下：H4‑F：5’‑GATTTCGTTCTCCATATCATGCTTT‑3’（SEQ ID NO.1），H4‑R：5’‑CCATTCTGACAAGCCCACAA‑3’（SEQ ID NO.2），H4‑P：5’‑ TGCTTGTAGCACTGCTTTTGGCCTTCA ‑3’（SEQ ID NO.3）；和用于检测禽流感病毒H6亚型的引物和探针，其序列如下：H6‑F：5’‑ TCGAGCAGTCTAGTTTTGGTAGGA ‑3’（SEQ ID NO.4），H6‑R：5’‑ CACTGCATTGAACCATTTGAACA ‑3’（SEQ ID NO.5），H6‑P：5’‑ TGATCATGGCAATAGG –MGB‑3’（SEQ ID NO.6）；其中，荧光探针H4‑P和H6‑P的报告基团不相同。