[发明专利]一种埃博拉病毒快速分型鉴别检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种埃博拉病毒快速分型鉴别检测的试剂盒，特别是涉及一种利用多重实时荧光聚合酶链式反应技术鉴别本迪布焦埃博拉病毒(BDBV)、扎伊尔埃博拉病毒(EBOV)、苏丹埃博拉病毒(SUDV)和塔伊森林埃博拉病毒(TAFV)。本试剂盒主要包括RT-PCR反应液、引物探针混合液、RT-PCR反应酶系、DEPC H₂O，以及分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒。由于本试剂盒通过多种荧光通道分别检测的方式，应用一步法实时荧光PCR反应模式，能准确快速检测并鉴别出埃博拉病毒的四种型别，可广泛应用于埃博拉病毒病的早期鉴别诊断、疫情防控、检验检疫等多个领域。

主权项

一种埃博拉病毒分型鉴别检测试剂盒，包括：1)RT‑PCR反应液、引物探针混合液、RT‑PCR反应酶系、DEPC H₂O，阴性质控品、阳性质控品和2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中引物探针混合液由埃博拉病毒四种型特异性的正、反向引物，埃博拉病毒四种型特异性的探针组成，其特征在于： 1)本迪布焦埃博拉病毒特异性的正向和反向引物的序列分别是5’‑TTGGAAAGTAATGCGGTAAAATA‑3’和5’‑GCAGCCAATGTTCTCTTGATGT‑3’，本迪布焦埃博拉病毒特异性探针的序列是5’‑CTACTCCCTGCTGCCTCGAGTGGAAA‑3’，探针的两端分别结合有荧光发生基团FAM和荧光淬灭基团BHQ1；该对引物探针可特异性地检测本迪布焦埃博拉病毒，对其他型别埃博拉病毒无交叉反应； 2)扎伊尔埃博拉病毒特异性的正向和反向引物的序列分别是5’‑GATGCCAACGAYGCTGTGAT‑3’和5’‑TGCAAGAGGATGGAGACGAA‑3’，扎伊尔埃博拉病毒特异性探针的序列是5’‑TCAGTGGCTCAAGCTCGTTTTTCAGGT‑3’，探针的两端分别结合有荧光发生基团HEX和荧光淬灭基团BHQ1；该对引物探针可特异性地检测扎伊尔埃博拉病毒，对其他型别埃博拉病毒无交叉反应； 3)苏丹埃博拉病毒特异性的正向和反向引物的序列分别是5’‑TGGTGTTGTTGACCCGTATG‑3’和5’‑CGTCGTCCAAATTGAAGAGAT‑3’，苏丹埃博拉病毒特异性探针的序列是5’‑CCTGACTACGAGGATTCGGCTGAAG‑3’，探针的两端分别结合有荧光发生基团Texas Red和荧光淬灭基团Eclipse；该对引物探针可特异性地检测苏丹埃博拉病毒，对其他型别埃博拉病毒无交叉反应； 4)塔伊森林埃博拉病毒特异性的正向和反向引物的序列分别是5’‑CAACAACAAACACAGTCTTACAGG‑3’和5’‑TTATCCCTGGCGTATTCTTGA‑3’，塔伊森林埃博拉病毒特异性探针的序列是5’‑CTCCACACAAAACAATGACAATCCTGC‑3’，探针的两端分别结合有荧光发生基团Cy5和荧光淬灭基团Eclipse；该对引物探针可特异性地检测塔伊森林埃博拉病毒，对其他型别埃博拉病毒无交叉反应。