[发明专利]一种龙脷叶悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410540508.0 | 申请日: | 2014-10-14 |
公开(公告)号: | CN104285797A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 刘东锋;杨成东 | 申请(专利权)人: | 南京帝道农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211225 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明研究了一种龙脷叶悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变、悬浮细胞的培养等步骤,本发明方法所制备的龙脷叶悬浮细胞增殖率高,生长周期短,品质好,以期为工厂化生产提供技术支撑。 | ||
搜索关键词: | 一种 龙脷叶 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】:
一种龙脷叶悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变、悬浮细胞的培养,其主要步骤如下:(1)取龙脷叶幼嫩的叶片,在超净工作台上进行消毒处理;(2)取步骤(1)消毒处理过的叶片接入BEMB+6‑BA0.1mg/L+2,4‑D1mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,附加7.5g/L,琼脂30g/L蔗糖,温度23℃,湿度75%;(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织,对其进行C+诱变,剂量为1×1013ions/cm2,能量为30‑50keV;(4)取步骤(3)诱变后的愈伤组织,接入BEMB+NAA2mg/L+KT0.2mg/L培养基中进行愈伤组织增殖,附加7.5g/L,琼脂30g/L蔗糖,温度25℃,光照2500lx,湿度85%;(5)取步骤(4)增殖后的愈伤组织接入BEMB+NAA2mg/L+KT0.2mg/L培养基中进行悬浮细胞培养。
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