[发明专利]慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用在审
| 申请号： | 201410559278.2 | 申请日： | 2014-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN104372027A | 公开（公告）日： | 2015-02-25 |
| 发明（设计）人： | 齐绪峰;夏景波;陈卓莹;蔡冬青;吴彩红;王健欢;毛承舟;刘光辉 | 申请（专利权）人： | 暨南大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 苏运贞;陈燕娴 |
| 地址： | 510632 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用。所述载体在CMV启动子下游插入多克隆位点，能够被SpeI、BclI、EcoRI、PacI、XhoI、SalI及BamHI共7个限制性内切酶所识别。所述载体的应用包括：将目的基因插入到多克隆位点，实现目的基因的稳定表达；利用EF1α启动子驱动的EGFP及Puromycin抗性基因进行荧光示踪及抗药性筛选；利用已在3′LTR区域插入的LoxP位点及慢病毒的转录与反转录特性，在Cre重组酶表达的情况下实现外源基因及报告基因的有效删除。本发明的载体可通过与pCMVR8.74及pMD2.G载体共同转染293T细胞，实现慢病毒颗粒的包装。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒 表达 载体 plox cmv 及其 构建 应用 | ||
【主权项】：
一种基于Cre‑LoxP系统的慢病毒表达载体pLOX‑CMV‑E/P，其特征在于：该慢病毒表达载体pLOX‑CMV‑E/P是以慢病毒载体pLOX‑TERT‑riesTK为基础，通过插入多克隆位点构建pLOX‑MCS载体，同时在入多克隆位点末端引入由EF1α启动子驱动的EGFP及Puromycin抗性基因片段，进而构建慢病毒表达载体pLOX‑CMV‑E/P；所述载体pLOX‑CMV‑E/P所携带的多克隆位点由CMV启动子驱动，所携带的EGFP及Puromycin抗性基因由EF1α启动子驱动。
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