[发明专利]一种用酿酒酵母生产菌丝霉素的方法有效
| 申请号： | 201410561507.4 | 申请日： | 2014-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN104232712A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 夏新界;崔延春 | 申请（专利权）人： | 长沙中科晶博生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12N15/81;C12N15/66;C12R1/865 |
| 代理公司： | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人： | 袁靖 |
| 地址： | 410016 湖南省长沙市*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用酿酒酵母生产菌丝霉素的方法，包括以下步骤：a、改造并扩增菌丝霉素基因；b、构建酵母细胞中表达菌丝霉素基因的重组质粒pYES2-CPS-Plec；c、用重组质粒pYES2-CPS-Plec转化酿酒酵母INVSC1细胞；d、筛选阳性菌株，并进行酶切鉴定；e、培养转化菌，获得抗菌肽菌丝霉素菌液；f、对抗菌肽菌丝霉素的活性进行鉴定。本发明获得的菌丝霉素对大肠杆菌DH5α有明显的抑菌作用，且抑菌效果强于改造前的菌丝霉素。本发明采用的酿酒酵母表达系统具有以下优点：抑菌效果更好；生长速率快，易于高密度培养，产量高，无需采用甲醇诱导；表达分泌的蛋白产品易于分离纯化；具有多种翻译后修饰特性，如多肽折叠、糖基化、甲基化、乙酰化等；遗传背景清楚，易于对表达载体进行操作。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 酿酒 酵母 生产 菌丝 霉素 方法 | ||
【主权项】：
一种用酿酒酵母生产菌丝霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：改造菌丝霉素基因，合成并扩增菌丝霉素基因，序列见SEQ NO1；利用该改造的基因和启动子Ppgk基因，以及α‑信号肽基因构建能够在酵母中表达该菌丝霉素基因的重组质粒；然后用重组质粒转化酿酒酵母；筛选阳性菌株，培养转化菌，最后获得抗菌肽菌丝霉素菌液。
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