[发明专利]一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法

摘要

本发明公开了一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法，包括将活化的桑黄菌种接种于添加有富锌酵母和分心木提取物的液体种子培养基中，辅以在一定频率和强度的低频超声波中快速培养，再将桑黄液体菌种接入添加有富锌酵母和星油藤叶酶解物的液体发酵培养基中，辅以在一定频率和强度的极低频磁场中培养得富锌桑黄液体发酵产物。本发明通过种子液和发酵两阶段的低频超声波和极低频磁场中物理辅助协同发酵，以及分心木提取物、星油藤叶酶解物等外源添加物的协同作用，大幅度提高了最终桑黄发酵产物中有机锌、锌多糖的含量和活性。

主权项

一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法，其特征在于，包括步骤：(1)富锌桑黄液体种子液制备：将活化后的桑黄菌种接入液体种子培养基中进行桑黄液体种子培养，在桑黄液体种子培养第1天‑第4天，将培养基置于低频超声环境中，超声波频率为10KHz‑100KHz，超声波强度控制在0.1W/cm3‑0.9W/cm3，22℃‑28℃恒温，保持120r/min‑150r/min振荡培养1天‑8天后，得到富锌桑黄液体种子液；所述的液体种子培养基中含有富锌酵母0.04％‑0.4％和分心木提取物0.05％‑0.4％，％为质量百分比；(2)富锌桑黄的液体发酵培养：将步骤(1)中的富锌桑黄液体种子液按占液体发酵培养基体积5％‑20％的用量接入液体发酵培养基中进行桑黄液体发酵培养，在桑黄液体发酵培养第2天‑第4天，将液体发酵培养基置于极低频交变磁场环境中，磁场强度0.4mT‑5mT，交变磁场频率5Hz‑50Hz，22℃‑28℃恒温，保持140r/min‑160r/min振荡培养2天‑5天后，得到富锌桑黄发酵产物；所述的液体发酵培养基中含有富锌酵母0.04％‑0.4％和星油藤叶酶解物0.05％‑0.4％，％为质量百分比；所述的分心木提取物的制备方法包括：称取一定量的分心木，粉碎，先加占分心木重量10倍量‑16倍量的质量百分浓度为60％‑80％的乙醇水溶液在60℃‑80℃浸提1h‑2h，过滤后得到上清液，上清液浓缩后真空冷冻干燥得提取物Ⅰ；上述醇提后的分心木残渣加入占分心木重量10倍量‑20倍量的水在85℃‑95℃下浸提1h‑2.5h，过滤后得到上清液，上清液浓缩至1/4体积后加入浓缩物体积2倍量‑5倍量的无水乙醇，离心收集沉淀物，沉淀物真空冷冻干燥后得提取物Ⅱ，合并上述提取物Ⅰ和提取物Ⅱ得分心木提取物；所述的星油藤叶酶解物的制备方法，包括：将星油藤叶加水磨成浆液，灭酶；调节浆液pH4.0‑5.5，加入由纤维素酶和果胶酶构成的第一复合酶，在40℃‑50℃进行酶解反应0.5小时‑1.5小时，灭酶后调节浆液pH5.0‑7.0，加入由木瓜蛋白酶和中性蛋白酶构成的第二复合酶，于50℃‑60℃进行酶解反应1小时‑1.5小时，灭酶后离心，上清液经过滤、浓缩和干燥，得到星油藤叶酶解物。