[发明专利]一种松材线虫的快速制备方法

摘要

一种松材线虫的快速制备方法属于线虫制备技术领域，尤其涉及一种松材线虫的快速制备方法。本发明提供一种灵敏、快速的松材线虫的快速制备方法。本发明包括以下步骤。（1）将葡萄孢接种于PDA培养基上，25℃恒温培养箱中培养7天，待气生菌丝基本长满培养皿时接种松材线虫，每皿接种约200头线虫。将接种后的培养皿置25℃恒温培养箱中培养10-14天，待菌丝基本被线虫消耗完后，置于4℃储存备用。

主权项

一种松材线虫的快速制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）将葡萄孢接种于PDA培养基上，25℃恒温培养箱中培养7天，待气生菌丝基本长满培养皿时接种松材线虫，每皿接种约200头线虫；将接种后的培养皿置25℃恒温培养箱中培养10‑14天，待菌丝基本被线虫消耗完后，置于4℃储存备用；（2）松材线虫的分离采用贝尔曼漏斗分离法；其装置是将直径10‑15cm的玻璃漏斗架在铁架上，下面接一段约10cm的橡皮管，在橡皮管末端接一个1.5ml离心管，橡皮管上装一个弹簧夹；在漏斗内放一个用细铜纱制成的漏斗状网筛，将面巾纸或滤纸裁剪好后放置到漏斗状网筛上，用蒸馏水浸湿滤纸，然后将待分离的培养基材料切碎放置到滤纸上；加水淹没待分离培养基材料，静止分离24h；由于趋水性和自身的重量，线虫就离开培养基材料，沉降到漏斗底部的离心管中；关闭弹簧夹，取下离心管，将管中收集到的线虫转移至另一离心管中，备用；（3）将收集到的松材线虫及虫卵进行消毒处理。