[发明专利]一种促肝细胞生长素的制备方法

摘要

本发明公开了一种促肝细胞生长素的制备方法，包括如下步骤：1)乳猪肝预处理；2)均质；3)酶解：乳猪肝匀浆置于反应容器中，滴加盐酸溶液至pH值为2.5-3.0，再加入胃蛋白酶搅拌后，将反应容器及其内容物置于水浴锅中水解得到酶解物料；4)灭活；5)离心；6)粗滤：将中性离心液先后经过截留分子量为100KD的中空纤维超滤装置和截留分子量为10KD的中空纤维超滤装置进行过滤得到粗滤液；7)超滤：粗滤液经截流分子量为6000D的超滤膜进行超滤得到促肝细胞生长素溶液。本发明工艺简单温和，而且节能环保，提取率高；所制备的促肝细胞生长素的活性较高，并且分子量小于6000D，安全性高，对人的过敏反应基本消除。

主权项

一种促肝细胞生长素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： S1、乳猪肝预处理：取乳猪肝，去除胆囊、筋膜和结缔组织，清水洗净，沥水后再用注射用水清洗，然后切成宽度为3‑5cm的小块或细条状，再置于绞肉机中绞成粒径为1‑3mm的乳猪肝颗粒； S2、均质：将S1得到的乳猪肝颗粒加入胶体磨中以2800‑3000rpm的转速研磨2.5‑4.5min得到乳猪肝糜，将乳猪肝糜和注射用水按重量比为1‑2:1‑2加入搅拌机中，以280‑300rpm的转速搅拌15‑18min得到乳猪肝匀浆； S3、酶解：将S2得到的乳猪肝匀浆置于反应容器中，滴加3‑5mol/L盐酸溶液至pH值为2.5‑3.0，再加入胃蛋白酶以150‑180rpm的转速搅拌22‑25min后，将反应容器及其内容物置于37‑45℃的水浴锅中水解6‑8h得到酶解物料，其中乳猪肝匀浆与胃蛋白酶的重量比为99‑101:0.4‑0.6； S4、灭活：将S3得到的酶解物料水浴加热至81‑82℃，保温10‑13min后，将温度降至室温静置得到灭活匀浆； S5、离心：将S4得到的灭活匀浆加入离心瓶中，以3700‑4200rpm的转速离心13‑17min后，将上清液取出滴加3‑5mol/L氢氧化钠溶液至pH为6.8‑7.2得到中性离心液； S6、粗滤：将S5得到的中性离心液经过截留分子量为100KD的中空纤维超滤装置进行第一次过滤后，再经过截留分子量为10KD的中空纤维超滤装置进行第二次过滤得到粗滤液，其中第一次过滤和第二次过滤的回流压力为0.05‑0.10MPa； S7、超滤：将S6得到的粗滤液再经截流分子量为6000D的超滤膜进行超滤得到促肝细胞生长素溶液，其中进液压力为0.15‑0.20MPa，回流压力为0.05‑0.10MPa。