[发明专利]裂谷热病毒核酸分子特征标准样品及其制备方法在审
申请号: | 201410597296.X | 申请日: | 2014-10-30 |
公开(公告)号: | CN104388584A | 公开(公告)日: | 2015-03-04 |
发明(设计)人: | 薛芳;李云峰;孙时;冯晓明 | 申请(专利权)人: | 薛芳 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/66;C12R1/93 |
代理公司: | 大连科技专利代理有限责任公司 21119 | 代理人: | 龙锋 |
地址: | 116001 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种裂谷热病毒核酸分子特征标准样品的制备方法,通过序列的合成、克隆载体、目的片段和载体的连接、质粒转化以及重组质粒的提取、冻干保存等步骤制得裂谷热病毒核酸分子特征标准样品,本发明制备出一种包含病毒特征序列信息、适于分析样品中该病毒及含量水平的标准样品;本发明提供的标准样品均匀性好、稳定性强、可长期保存、纯度好,并且制备方法过程简单,可以为裂谷热病毒检测研究、医用研究等提供标准样品,以实现不同实验室结果比对,从而保证实验室的质量控制;同时也为检验检疫机构、进出口贸易等企业实现对裂谷热病毒的快速准确检测提供了标准样品。 | ||
搜索关键词: | 裂谷 病毒 核酸 分子 特征 标准 样品 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
裂谷热病毒核酸分子特征标准样品的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1) 合成病毒序列,其序列如Sequence NO.1所述:并在每段序列前增加一个T7启动子;2) 将合成序列平端克隆入质粒并通过酶切鉴定及胶纯化;3) 目的片段和载体的连接反应;4) 通过感受态细菌转化质粒;5) 重组质粒提取;6) 采用分光光度计法对重组质粒进行质量检测;7) 选取纯度和完整性均合格的重组质粒,将溶液混合在一起,并再次测定浓度和纯度,然后进行分装冻干,将制备好的标准样品置于‑80℃冰箱保存。
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