[发明专利]一种诱导牛成纤维细胞/成肌细胞转分化为脂肪细胞的方法在审
| 申请号： | 201410606153.0 | 申请日： | 2014-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN104372024A | 公开（公告）日： | 2015-02-25 |
| 发明（设计）人： | 成功;昝林森;王虹 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12N5/10 |
| 代理公司： | 陕西增瑞律师事务所 61219 | 代理人： | 孙卫增 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种诱导牛成纤维细胞/成肌细胞转分化为脂肪细胞的方法，克隆牛转录因子CCAAT增强子结合蛋白C/EBPβ基因，构建C/EBPβ基因过表达载体并包装获得重组腺病毒。腺病毒侵染牛成纤维细胞、成肌细胞实现上述细胞快速转分化为脂肪细胞。该脂肪细胞具有明显的脂滴形成和成脂关键基因表达。本发明可为研究脂肪细胞分化、家畜脂肪沉积机理提供一个很好的细胞模型。同时，为培育“大理石花纹”明显、富含肌内脂肪的优质肉牛新品种提供了新思路和新候选功能基因，具有重要应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 诱导 纤维 细胞 化为 脂肪 方法 | ||
【主权项】：
一种诱导牛成纤维细胞/成肌细胞转分化为脂肪细胞的方法，其特征在于，包括以下操作：克隆牛C/EBPβ基因序列并在其上游添加Kozak序列，然后将克隆的C/EBPβ基因构建到穿梭载体中，再通过穿梭载体与腺病毒骨架载体的同源重组，将C/EBPβ基因构建到腺病毒骨架载体当中，得到重组腺病毒载体；将重组腺病毒载体转染宿主细胞，在重组腺病毒载体被表达后，获取包含C/EBPβ基因的重组腺病毒Ad‑C/EBPβ；将重组腺病毒Ad‑C/EBPβ侵染原代牛成纤维细胞/成肌细胞进行诱导转分化，在侵染6天后，牛成纤维细胞/成肌细胞被诱导转分化为牛脂肪细胞。
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