[发明专利]小麦线条花叶病毒的环介导等温扩增检测引物组、检测试剂盒及检测方法有效
申请号: | 201410632656.5 | 申请日: | 2014-11-12 |
公开(公告)号: | CN104480220A | 公开(公告)日: | 2015-04-01 |
发明(设计)人: | 徐颖;徐亚飞;黄世杰;邱志君;刘永丰;郑炜 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国北仑出入境检验检疫局 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 | 代理人: | 何仲 |
地址: | 315800 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种小麦线条花叶病毒的环介导等温扩增检测引物组、检测试剂盒及检测方法,特点是LAMP的两对引物如下WSMV1-F3、WSMV1-B3、WSMV1-FIP、WSMV1-BIP,RT-LAMP反应体系如下:2μLWSMV1-FIP溶液,2μLWSMV1-BIP 溶液,0.25μLWSMV1-F3溶液,0.25μLWSMV1-B3 溶液,12.5μL 2×反应缓冲液,1μLBst DNA聚合酶和AMV逆转录聚合酶组成的聚合酶混合液,1μL钙黄绿素,2.5μL RNA模板,无Rnase的水补至25μL,检测方法包括总RNA的提取;RT-LAMP引物的设计和合成;配制 RT-LAMP反应体系;WSMV的RT-LAMP目视检测,优点是灵敏度高,特异性强且简便快速。 | ||
搜索关键词: | 小麦 线条 花叶 病毒 环介导 等温 扩增 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
一种小麦线条花叶病毒的环介导等温扩增检测引物组,其特征在于LAMP的两对引物序列如下:外侧上游引物 WSMV1‑F3 :5’‑acaaaggccatatacatgcc ‑3’;外侧下游引物 WSMV1‑B3:5’‑gcttcgcagctttgtacatt ‑3’;内侧上游引物 WSMV1‑FIP:5’‑tgttaagttgctcagttgtttaaagcctgaaatgataaata ‑3’;内侧下游引物 WSMV1‑BIP:5’‑cactgcataatcaacacaactaaactcgagttgctgctca ‑3’。
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