[发明专利]一种用于饲料中动物源性成分检测的试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种用于饲料中动物源性成分检测的试剂盒，该试剂盒包括由外引物Ⅰ、外引物Ⅱ、内引物Ⅰ和内引物Ⅱ配制而成的检测引物溶液；具有链置换活性的BstDNA聚合酶；10×反应缓冲液；dNTPs溶液；阳性DNA对照样品；阴性DNA对照样品；显色剂。同时本发明还公开了该试剂盒的检测方法。本发明具有高特异性，且具有快速高效、操作简便，检测成本低的特点，适合现场快速检测。

主权项

一种用于饲料中动物源性成分检测的试剂盒，包括—检测引物溶液：由浓度为4~6 µmol/L的外引物Ⅰ、浓度为4~6 µmol/L的外引物Ⅱ、浓度为32~48 µmol/L的内引物Ⅰ和浓度为32~48µmol/L的内引物Ⅱ配制而成；—具有链置换活性的Bst DNA聚合酶：浓度为7~9U/μL；—10×反应缓冲液： 200 mmol/L且pH= 8.8的Tris‑HCl，100 mmol/L KCl，100 mmol/L (NH₄)₂SO₄，40~100 mmol/L MgSO₄，6~14 mol/L 甜菜碱； —dNTPs 溶液：由浓度分别为10 mmol/L 的 dATP、dCTP、dGTP、dTTP 四种脱氧核糖核苷酸溶液等体积混合而成；—阳性 DNA 对照样品：含有脊椎动物线粒体高度保守DNA序列的大肠杆菌质粒 DNA，或者食品中常见的猪、牛、羊、鸡、鸭和鱼的总DNA样品；—阴性 DNA 对照样品：不含脊椎动物线粒体高度保守DNA序列的 DNA；—显色剂：1000×SYBR GREEN I 荧光染料。