[发明专利]两个DNA片段一步PCR融合的方法在审
申请号: | 201410640984.X | 申请日: | 2014-11-13 |
公开(公告)号: | CN104531674A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 陈国梁;贺晓龙;张向前 | 申请(专利权)人: | 延安大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 西安弘理专利事务所 61214 | 代理人: | 韩玙 |
地址: | 716000 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明两个DNA片段一步PCR融合的方法,具体按照以下步骤实施:步骤1、获取DNA1片段、DNA2片段模板及DNA1片段的第一上游引物U1、第一下游引物L1、DNA2片段的第二上游引物U2、第二下游引物L2;步骤2、对步骤1中得到的DNA1片段以第一上游引物U1、第一下游引物L1为引物,DNA2片段以第二上游引物U2、第二下游引物L2为引物,在PCR仪中进行PCR一步扩增得到融合DNA片段。本发明方法,采取了以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术,本发明方法通过对引物的设计、对各片段进行独立扩增,从而完成片段间的相互融合,为同源重组片段的构建提供了快速简捷的途径;本发明方法只需要一个PCR反应就可以得到融合基因,大大缩短了反应所需时间,降低了反应操作难度。 | ||
搜索关键词: | 两个 dna 片段 一步 pcr 融合 方法 | ||
【主权项】:
两个DNA片段一步PCR融合的方法,其特征在于,具体按照以下步骤实施:步骤1、获取DNA1片段、DNA2片段模板及DNA1片段的第一上游引物U1、第一下游引物L1、DNA2片段的第二上游引物U2、第二下游引物L2;步骤2、对步骤1中得到的DNA1片段以第一上游引物U1、第一下游引物L1为引物,DNA2片段以第二上游引物U2、第二下游引物L2为引物,在PCR仪中进行PCR一步扩增得到融合DNA片段。
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