[发明专利]金边玉簪的组织培养快繁方法

摘要

本发明涉及一种金边玉簪的组织培养快繁方法，解决此品种分株繁殖速度较慢，增殖系数极低的生产问题，该方法包括以下的步骤：1)外植体的选择；2)外植体灭菌；3)外植体初代培养；4)增殖培养；5)壮苗培养；6)生根培养；7)移栽驯化。本发明以植株基部分化芽为外植体，以MS为基本培养基，利用萘乙酸(NAA)、6-苄胺基嘌呤(6BA)，吲哆丁酸(IBA)激素调节，建立金边玉簪再生体系的方法。该发明一个增殖继代周期为4-6周，增殖系数控制在4-6倍，且不受季节的影响，可极大提高种苗繁殖系数，为该品种的开发和利用提供科学、有效的繁殖方法，满足生产需求进行产业化生产。

主权项

一种金边玉簪的组织培养快繁方法，其特征是：包括以下几个步骤：1)外植体的选择：春季，选择健康植株萌发出来的嫩芽，用锋利刀片切下；2)外植体灭菌：切去叶片的2/3，先用自来水洗净后，加适量洗洁精自来水冲洗30‑40分钟，用滤纸吸干；加入质量百分比浓度1‰氯化汞溶液，加2滴吐温20(Tween20)浸泡，量至漠过外植体材料，摇晃，8‑10分钟后倒掉消毒液，然后，用无菌水冲洗外植体材料3‑5次，表面没有泡沫后，吸干；3)初代培养：将消毒好的外植体切去边缘，插于基本培养基(MS)上，培养20‑30天。培养室内为22‑25℃，光14小时，黑暗10小时,光照强度为1800～2000勒克斯(Lux)，Lux为：照度的国际单位；4)增殖培养：将初代培养外植体材料，转接于MS+NAA0.1+6BA2培养基上培养4‑6周后，所述培养基构成为：基本培养基(MS)附加0.1mg/L萘乙酸(NAA)和2mg/L6‑苄胺基嘌呤(6‑BA),每个外植体萌发出4‑8个小侧芽；切取新长出的侧芽，去叶片后插入增殖培养基中，若需大量繁殖，可进行重复培养；培养室内为22‑25℃，光14小时，黑暗10小时，光照强度为1800～2000勒克斯(Lux)；5)壮苗培养：将长到1‑2cm长的丛生芽剪切后移入壮苗培养基基本培养基(MS)中，培养3‑4周，无菌苗长到2‑4cm高度即可转入生根培养基中，增殖培养中的较大的无菌苗可直接转入生根培养基中。培养室内22‑25℃，光14小时，黑10小时，光照强度为1800～2000勒克斯(Lux)；6)生根培养：将在壮苗培养基中无菌苗转接至生根培养基1/2MS+NAA0.5+IBA1+活性炭，所述培养基构成为：基本培养基(MS培养基中大量元素含量减半)附加0.5mg/L萘乙酸(NAA)、1mg/L吲哆丁酸(IBA)和活性炭3000mg/L,于24‑26℃，光12小时，黑12小时，光照强度为1800～2000勒克斯(Lux)，培养1‑2周；7)驯化移栽：待根长1‑2cm时，将瓶苗移置过渡培养间。瓶膜稍敞开，但并不完全揭开，保持瓶内与室内环境一至，1‑2天后，去掉瓶膜1天。调水温20‑22℃，洗去无菌苗根部的培养基，移入含有珍珠岩：蛭石体积比2：1的基质中，在保湿保温条件下进行驯化培育，逐步降低湿度、温度，30天后，计算成活率。