[发明专利]一种人外周血间充质干细胞的培养方法以及应用有效
| 申请号： | 201410690907.5 | 申请日： | 2014-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN104388385B | 公开（公告）日： | 2018-06-08 |
| 发明（设计）人： | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;陈洁鸿;王小燕;罗二梅 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;A61K35/28;A61P17/16 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，公开了一种人外周血间充质干细胞的培养方法以及应用。本发明所述培养方法先采集外周血，分离出血浆和外周血单个核细胞；将外周血单个核细胞用含所述血浆的M199培养基进行重悬，然后加入EGF因子培养3‑5天；去掉未贴壁的悬浮细胞，更换前述添加了血浆和EGF因子的M199培养基继续培养；当细胞达到80％‑90％融合时，消化细胞，获得培养后的PB‑MSC。本发明将从外周血分离出的外周血单个核细胞以有别于传统方式的不同培养基进行有效培养，避免采用动员剂，保证了培养后的PB‑MSC数量，同时提供了PB‑MSC在抗皮肤衰老中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 外周血单个核细胞 培养基 血浆 间充质干细胞 人外周血 外周血 应用 生物技术领域 细胞 传统方式 皮肤衰老 悬浮细胞 有效培养 贴壁 重悬 采集 消化 融合 保证 | ||
【主权项】：
一种人外周血间充质干细胞的培养方法，其特征在于，包括：步骤1、采集外周血，分离出血浆和外周血单个核细胞；步骤2、将外周血单个核细胞用含步骤1所述血浆的M199培养基进行重悬，然后加入EGF因子培养3‑5天；所述血浆的体积百分含量为10％，所述EGF因子的浓度为5‑30ng/ml；步骤3、去掉未贴壁的悬浮细胞，更换步骤2所述的添加了血浆和EGF因子的M199培养基继续培养，此后每2天更换一次新鲜培养基；步骤4、当细胞达到80％‑90％融合时，消化细胞，获得培养后的PB‑MSC。
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