[发明专利]一种快速高通量的疟原虫检测方法

摘要

本发明涉及一种快速、高通量的疟原虫检测方法。本发明的检测方法整合了聚合酶链式反应PCR和微阵列这两种强大的分子生物学技术，把PCR杂交的探针直接固定在微阵列中的杂交舱中，与PCR反应室在同一张芯片上；检测方法包括：血液样本DNA液提取，PCR扩增，杂交，清洗，结果判读。本发明能对恶性疟、间日疟、三日疟原虫进行快速灵敏的检测，通过本发明可大幅度提高进出口口岸一线检验检疫人员的检测效率，既可减少工作量、又可最大限度地解决传统检测方法可能存在的阳性漏检问题，从而最大限度地防止疟原虫疫情的发生。

主权项

一种快速高通量的疟原虫检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)血液样本进行DNA液提取；(2)PCR扩增：a.PCR反应体系包括：PCR反应缓冲液,待测样本基因特异性正、反向引物，PCR Grade H₂O,PCR Control,DNA提取液；b.将PCR反应液加入已含有待测基因特异性探针的芯片反应室内，将芯片放入机器进行扩增反应；特异性探针是根据特异性引物扩增区内设计，能够区别其他物种；特异性探针点入芯片上；(3)杂交：PCR扩增完后，将杂交反应液加入芯片，使杂交液和扩增液都进入到杂交舱内杂交反应；(4)清洗：杂交后的芯片用洗液冲洗，直接用荧光扫描仪检测；(5)结果判读；所述的待测样本基因为恶性疟、间日疟、三日疟各自特有基因。