[发明专利]一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法有效
| 申请号： | 201410699684.9 | 申请日： | 2014-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN104531686A | 公开（公告）日： | 2015-04-22 |
| 发明（设计）人： | 李奎;阮进学;杨述林;李和刚;牟玉莲;吴添文;魏景亮;徐奎;黄雷;周荣 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/63;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京市京大律师事务所 11321 | 代理人： | 王凝;张波 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法，该包括以下步骤：1)设计被敲除基因的5’端同源臂和3’端同源臂以及相应的通用引物；2)将上述同源臂、通用引物和欲插入的基因引入到载体中，得到打靶载体；3)转染细胞；4)PCR扩增鉴定插入结果。本发明主要是依托猪H11位点切割系统设计打靶载体，该载体它能够将外源基因精确的引入到猪的H11位点中，以解决传统打靶技术效率低下，PCR检测引物不便设计，检测难度大的问题。本发明提供的定点插入方法能让外源基因稳定在H11表达，为猪转基因搭建了稳定的平台。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 定点 切割 系统 h11 插入 方法 | ||
【主权项】：
一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)设计被敲除基因的5’端同源臂和3’端同源臂以及相应的通用引物；2)将上述同源臂、通用引物和欲插入的基因引入到载体中，得到在打靶载体；3)转染细胞；4)PCR扩增鉴定插入结果。
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