[发明专利]黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法及其应用

摘要

本发明提供一种黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法：黄绿蜜环菌子实体超微粉碎后，加入乙醇进行提取，然后过滤取上清减压浓缩，加入正己烷-乙醇二元混合溶剂溶解后样品在Silica正相分离色谱上分离，采用A正己烷、B乙醇二元流动相，按0～18min93％A、18～28min 60％A、28～45min 5％A洗脱，根据紫外吸收光谱收集20-26min、27.25-28.5min、38.5-41min洗脱液，减压浓缩并烘干，得到本发明抗肝癌活性组分。该分离方法稳定，重复性高，制备量大，操作简单省时，适合工业化大生产，得到的目的组分可用于制备抗肝癌药物中。

主权项

一种黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于包括以下步骤：(1)以黄绿蜜环菌子实体为原料，室温阴干处理后，在40～60℃温度下烘干脱水，然后进行超微粉碎处理，获得超微粉；(2)将步骤(1)所得的超微粉按1g︰(5～15)mL的料液比加入乙醇，在30～70℃温度下提取1～6h，每0.5h～1h搅拌一次，室温静止1～5h后离心，取沉淀重复1～3次，合并所得上清液减压浓缩至膏状，获得黄绿蜜环菌小分子乙醇提取物；(3)按质量体积比加入5～10倍的正己烷‑乙醇二元混合溶剂，进行超声溶解，溶解后过有机滤膜，得到黄绿蜜环菌小分子乙醇提取物的样品溶液；(4)将步骤(3)获得的小分子乙醇提取物的样品溶液在以填料为正相分离材料Silica的制备色谱上进行分离纯化，采用A为正己烷、B为乙醇的二元流动相体系，分离纯化的条件为：0～18min 93％A‑7％B等度洗脱、18～28min 60％A‑40％B等度洗脱、28～45min 5％A‑95％B等度洗脱，根据紫外吸收光谱收集20‑26min洗脱液、27.25‑28.5min洗脱液、38.5‑41min洗脱液，减压浓缩并烘干，得到本发明抗肝癌活性组分。