[发明专利]从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法及其应用

摘要

本发明提供一种从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法将黄绿蜜环菌子超微粉碎后加入丙酮冷浸提取，过滤取上清减压浓缩；溶解后在Silica正相硅胶色谱柱分离，采用A相正己烷、B相乙酸乙酯二元流动相，按A相100％0～15min、A相60％15～35min、B相100％35～60min洗脱，收集25‑29min洗脱液减压浓缩；溶解后再在Silica正相硅胶色谱柱分离，采用A相正己烷、B相乙酸乙酯二元流动相，按A相88％0‑45min洗脱，收集27.5‑36min洗脱液旋转蒸发，得到纯度达95％以上的麦角甾醇。该分离方法稳定，重复性高，制备量大，得到的麦角甾醇可用于制备抗肝癌药物中。

主权项

一种从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)以黄绿蜜环菌子实体为原料，室温阴干处理后，在40～60℃温度下烘干脱水，然后进行超微粉碎处理，获得超微粉；(2)将超微粉按1g︰(6～15)mL的料液比加入分析纯水，混合均匀后在60～90℃温度下提取1～2h，提取结束后在4000～8000rpm转速下离心，取沉淀重复1～3次，最后得到沉淀放入烘箱50～80℃干燥处理；(3)在步骤(2)所得的干燥沉淀中按质量体积比加入1～5倍的丙酮冷浸提取3～8h，提取结束后在4000～8000rpm转速下离心，取沉淀重复1～3次，收集所有上清液减压浓缩至膏状，获得小分子提取物；(4)在小分子提取物中按质量体积百分比加入5～10倍的正己烷‑乙酸乙酯二元混合溶剂，进行超声溶解，溶解后过有机滤膜，得到含有小分子提取物的一维上样溶液；(5)对一维上样溶液进行高效液相色谱分离：采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用的流动相为二元混合有机相，其中A相为正己烷，B相为乙酸乙酯，进样量为800‑1200mL/针，流动相流速为600‑750mL/min，检测器为紫外检测器，检测波长260nm，采用的洗脱方式为A相浓度100％等度洗脱0～15min、A相浓度60％等度洗脱15～35min、B相浓度100％等度洗脱35～60min，根据紫外吸收光谱收集25‑29min洗脱液作为目的组分，减压浓缩至膏状，得到一维液相组分；(6)在得到的一维液相组分中按质量体积百分比加入5～10倍的正己烷‑乙酸乙酯二元混合溶剂，进行超声溶解，溶解后过有机滤膜，得到二维上样溶液；(7)进行二维高效液相色谱分离：采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用的流动相为二元混合有机相，其中A相为正己烷，B相为乙酸乙酯，进样量为20‑80mL/针，流动相流速为40‑80mL/min，检测器为紫外检测器，检测波长260nm；采用的洗脱方式为A相浓度88％等度洗脱0‑45min，根据紫外吸收光谱收集27.5‑36min洗脱液作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，即为本发明目的化合物麦角甾醇。