[发明专利]从万寿菊中分离纯化槲皮万寿菊素的方法

摘要

本发明提供一种从万寿菊中分离纯化槲皮万寿菊素的方法，它包括以下步骤：将万寿菊干花干燥后磨成粉末，用乙醇浸泡或回流提取，过滤的滤液旋转蒸发至干后溶于甲醇‑水混合溶剂中；进行一维液相色谱：以DAISO C18为色谱柱，A相水、B相甲醇为流动相，B相浓度50‑55％等度洗脱20min，根据紫外吸收光谱收集6‑12分钟洗脱液作为目的组分，旋转蒸发至干后再溶于甲醇‑水混合溶剂；进行二维液相色谱：以Acchrom X‑Amide为色谱柱，A相水、B相乙腈为流动相，B相浓度92‑98％等度洗脱40min，根据紫外吸收光谱收集27‑33分钟洗脱液作为目的组分，旋转蒸发至干得到纯度达99％以上的槲皮万寿菊素。

主权项

1.一种从万寿菊中分离纯化槲皮万寿菊素的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）以万寿菊干花为原料，干燥后磨成粉末状得到万寿菊粗粉，用乙醇浸泡或者回流提取，然后过滤，取滤液重复1‑3次，最终所得滤液进行旋转蒸发至干得粗提物，粗提物再溶于甲醇‑水二元混合溶剂中，进行减压抽滤，得到粗提物浓度为50‑500mg/mL的提取液；所述甲醇‑水二元混合溶剂中甲醇体积分数为90‑99%；（2）对提取液进行一维液相色谱分离：采用的色谱柱为反相色谱柱DAISO C18，色谱柱的尺寸为直径20mm、长度250mm，其中填料粒径为8μm，使用时柱温为室温或25‑40℃；采用的流动相为A相水、B相甲醇的二元流动相，进样量为100‑1000μL /针，连续进样，流动相流速为6‑16mL/min，洗脱方式为B相浓度53%等度洗脱20min，检测器为紫外检测器、检测波长200‑260nm，根据紫外吸收光谱收集6‑12分钟洗脱液作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到一维液相组分；（3）使用甲醇‑水二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解至浓度为50‑100mg/mL；所述甲醇‑水二元混合溶剂中甲醇体积分数为90‑99%；（4）进行二维液相色谱分离：采用的色谱柱为Acchrom X‑Amide色谱柱，色谱柱的尺寸为直径10mm、长度250mm，其中填料粒径为8μm，使用时柱温为室温或25‑40℃；采用的流动相为A相水、B相乙腈的二元流动相，进样量为10‑500μL/针，连续进样，流动相流速为2‑4mL/min，洗脱方式为B相浓度95%等度洗脱40min，检测器为紫外检测器、检测波长200‑260nm，根据紫外吸收光谱收集27‑33分钟洗脱液作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到目的产物槲皮万寿菊素。