[发明专利]人CYP3A5基因检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种人CYP3A5基因检测方法，包括提供待测样品、核酸扩增体系和荧光检测体系混合物；通过扩增反应循环扩增靶多核苷酸；使荧光发生基团与被扩增的靶多核苷酸序列间接结合；测定荧光量；所述核酸扩增体系至少分别包含CYP3A5基因CYP3A5*1和CYP3A5*3多态性的特异性正向引物和反向引物。本发明还公开了上述人CYP3A5基因检测试剂盒，包括分别装有反应液、EZ Taq酶混合液、标准液1、标准液2的多个密封离心管，分隔并集中包装这些离心管的试剂盒。本发明试剂盒可广泛应用于人CYP3A5基因检测，指导临床上他克莫司药物的使用，减少不良反应的发生和避免药物资源的浪费，降低排异反应。

主权项

一种人CYP3A5基因检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)提供包括待测样品、核酸扩增体系和荧光检测体系的混合物；(2)通过扩增反应循环扩增待测样品中的靶多核苷酸；(3)使所述荧光检测体系中的荧光发生基团与被扩增的靶多核苷酸序列间接结合；(4)测定荧光发生基团所产生的荧光量，从而确定靶多核苷酸的存在及其相对量；所述核酸扩增体系由如下组分组成：耐热DNA聚合酶、2’‑脱氧核苷三磷酸、CYP3A5基因CYP3A5*1多态性的特异性正向引物和反向引物、CYP3A5基因CYP3A5*3多态性的特异性正向引物和反向引物；所述荧光检测体系是能够与靶多核苷酸结合并且两端分别结合有荧光发生基团和荧光淬灭基团的两条寡核苷酸探针。