[发明专利]一种蛋白质N-端富集方法及其应用有效
申请号: | 201410747402.8 | 申请日: | 2014-12-09 |
公开(公告)号: | CN105738169B | 公开(公告)日: | 2018-09-21 |
发明(设计)人: | 张丽华;陈玲凡;单亦初;杨开广;张玉奎 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N30/08 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 马驰 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明涉及一种蛋白质N‑端富集方法,包括:选择性胍基化标记、磷酸根标记、磷酸根亲和材料富集。蛋白质样品首先采用碱性磷酸酶去除磷酸化翻译后修饰,然后在强碱性条件下对蛋白侧链氨基进行选择性的胍基化标记封闭侧链氨基,剩余的蛋白末端氨基采用带有磷酸根的氨基活性试剂进行标记使末端带上磷酸根标签,对标记的蛋白进行酶解,最后采用磷酸根亲和富集材料吸附带有磷酸根标签的N‑端肽段,从而得到蛋白质N‑端。本发明的优点是高效的胍基化、磷酸根标记和亲和材料富集,使得蛋白N端的富集具有优异的富集效率与选择性。 | ||
搜索关键词: | 一种 蛋白质 富集 方法 | ||
【主权项】:
1.一种蛋白质N‑端富集方法,包括:蛋白质样品去除自身的磷酸化翻译后修饰后,通过选择性的胍基化反应封闭蛋白质样品的侧链氨基,然后对蛋白质剩余的N‑端氨基进行磷酸根标记,对标记的蛋白进行酶解后,采用二氧化肽亲和富集带有磷酸根标签的N‑末端肽段。
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