[发明专利]一种人白细胞介素-29的重组变异体及其制备方法在审
| 申请号： | 201410756203.3 | 申请日： | 2014-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN104402988A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 陈伟;陆源;李利云;邬敏辰;吴静 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C07K14/54 | 分类号： | C07K14/54;C12N15/24;C12N15/81;C12N1/19;C12P21/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种人白细胞介素-29(hIL-29)成熟肽第33位赖氨酸定点突变为精氨酸的重组hIL-29变异体(rhIL-29L)及其制备方法，属于生物工程领域。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工设计合成hIL-29成熟肽的上下游引物和定点突变引物；2)用上下游引物及突变引物对hIL-29成熟肽编码基因第98位碱基进行定点突变；3)构建含hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，转化毕赤酵母，获得重组酵母工程菌；4)培养重组酵母工程菌，于培养液添加1.5％(v/v)甲醇诱导其表达hIL-29变异体；5)采用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析从培养液上清纯化hIL-29变异体。本发明构建的重组酵母工程菌可进行高密度培养并分泌表达rhIL-29L，适用于工业化制备rhIL-29成熟肽变异体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 白细胞 29 重组 异体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
本发明中的重组人白细胞介素‑29变异体(rhIL‑29L)特征在于表达的IL‑29肽链中第33位氨基酸赖氨酸(Lys)经人工定点突变为精氨酸(Arg)，对应于序列表中的SEQ ID NO：1。
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