[发明专利]一种人体尿液中8-羟基脱氧鸟苷、8-羟基鸟苷和8-异构前列腺素F2α的分析方法

摘要

本发明属于一种人体尿液中8-羟基脱氧鸟苷、8-羟基鸟苷和8-异构前列腺素F2α的分析方法，其特征在于：采用该方法可较为方便和快速地定量检测出活性氧引起的体内代表性氧化应激生物标志物的变化情况，可用于评估体内氧化损伤和修复程度，研究疾病病理过程。本发明采用AgilentBondEluC18固相萃取柱，可同时净化尿液中两类不同质谱检测模式的三种化合物：8-羟基脱氧鸟苷、8-羟基鸟苷（正离子模式检测）和8-异构前列腺素F2α（负离子模式检测），并采用相同的液相色谱柱和流动相对三种化合物进行液相色谱串联质谱检测。该方法前处理简单便捷，灵敏度高、重复性和回收率好。

主权项

一种人体尿液中8‑羟基脱氧鸟苷、8‑羟基鸟苷和8‑异构前列腺素F2α的分析方法，其特征在于：包括以下步骤：将解冻好的尿液1mL，在37ºC下加热5min溶解可能混在沉淀中的目标化合物，加入[C¹³N¹⁵]‑8‑羟基鸟苷和D₄‑8‑异构前列腺素F2α的混合内标溶液；采用Agilent Bond EluC18固相萃取柱对尿液样品中的8‑羟基脱氧鸟苷、8‑羟基鸟苷和8‑异构前列腺素F2α进行净化，具体过程是：尿液上样至已活化的Agilent Bond EluC18固相萃取柱上，2ml H₂O洗涤，2ml 体积比为1∶4的甲醇/H₂O洗脱属于第一集分的8‑羟基‑脱氧鸟苷和8‑羟基鸟苷，2ml体积比为5∶5的甲醇/H₂O洗杂质，最后再用2ml体积比为3∶1的甲醇/H₂O洗脱属于第二集分的8‑异构前列腺素F2α，将净化后的2个洗脱集分采用液相色谱‑串联质谱（HPLC‑MS /MS）方法检测8‑羟基脱氧鸟苷、8‑羟基鸟苷和8‑异构前列腺素F2α的浓度。